### 大鼠原代脂肪间充质干细胞的提取（SD大鼠）

#### 1. 实验材料准备

在本实验中，选择2周龄或体重约200克的SD大鼠作为实验对象。为确保操作的无菌性，准备必要的灭菌器械，如镊子、眼科直剪、眼科弯剪以及磁珠等。此外，需要备好5mL注射器、022μm滤器、泡沫板和图钉以固定大鼠。同时，使用75%乙醇进行消毒。其他必需品包括冷却的无菌PBS水、15mL和50mL无菌离心管、细胞筛和无菌培养瓶。培养基选择SD大鼠脂肪间质干细胞完全培养基。

#### 2. 实验操作

将所有所需物品置于超净工作台，并进行紫外线消毒，持续30分钟。接着，配制约5mL的0.1%Ⅰ型胶原酶，并进行滤菌处理。对大鼠实施颈部脱颈致死后，将其浸泡在75%酒精中，持续2-3分钟。然后，将大鼠固定在泡沫板上，剪开腹股沟区皮肤进入腹腔，以暴露出脂肪组织。小心剪取脂肪组织并置于PBS中，注意避免损伤血管。使用PBS对脂肪组织进行清洗，并剔除多余的血管和淋巴结。

将脂肪组织剪碎至适合的大小（例如2mm×2mm），加入胶原酶，在37℃下进行消化，每隔5分钟轻轻震荡一次或持续搅拌直至消化完成。消化后的细胞悬液转移至离心管，离心后弃去上层脂滴泡沫和上清液，使用培养基重悬沉淀。随后，将细胞悬液进行过滤，进行再次离心后，弃去上清，重悬并接种到培养瓶中。最后，将培养瓶放入37℃、含5%CO2的培养箱中进行培养。

#### 3. 注意事项

在实验过程中，需严格保持无菌操作，以避免细胞污染。脂肪组织的剪取和清洗须非常细致，以免损伤细胞或引入杂质。消化过程中需要严格控制时间和温度，避免过度消化导致细胞损伤。此外，离心和过滤操作应轻柔进行，以防止细胞损失或破裂。

本实验旨在探讨大鼠原代脂肪间充质干细胞的提取与培养方法，促进相关领域的研究进展。通过精确的操作流程，尤其是在脂肪组织的处理上，确保高质量的细胞源，为后续研究打下坚实的基础。在未来的实验中，我们期待能融合更多先进技术，推动生物医疗领域的不断发展，特别是在泛亚电竞品牌的推动下，提升整体科研效能。