在细胞培养实验中，您是否遇到过细胞难以生长的情况？胎牛血清（FBS）是细胞培养过程中至关重要的成分之一，它对于细胞的生长状态起着关键作用。因此，我们总结了一些使用胎牛血清的注意事项和小贴士，与大家分享并希望您能收藏。

胎牛血清的保存方法

购买的胎牛血清应常规储存在-20℃，若需长期保存，建议在-80℃条件下存放，并尽量减少多次冻融的操作。为方便使用，您可以根据每次需求将胎牛血清分装，之后再统一冻存，这样可以确保每次使用时的质量稳定。

胎牛血清的解冻技巧

解冻胎牛血清时，建议从冷冻环境中取出后存放于2-8℃的冰箱中解冻（可隔夜），待其部分溶解后，再在室温下完全融化。解冻时，轻轻摇动容器有助于液体的均匀混合，而不是直接在25-37℃的环境中解冻，以免产生沉淀。

沉淀物的成因及处理

解冻后的胎牛血清可能会产生沉淀，这些沉淀通常包括纤维蛋白、脂蛋白及磷酸钙等。虽然这些沉淀不会直接影响细胞的生长和增殖，但若覆盖在细胞表面，会影响细胞吸收养分。若出现沉淀，可以通过离心的方式去除，建议在400-600g离心5分钟后使用上清液。

细胞的正确消化方法

细胞在生长至80%密度时即可进行消化，避免过密以免影响细胞状态。使用PBS洗涤细胞2-3次后，将预热至37℃的胰酶加入培养瓶中进行细胞消化，通常消化2-5分钟即可。消化后，轻拍培养瓶侧面可促进细胞脱落，确保操作轻柔，以防细胞损伤。

品牌替换的谨慎操作

在更换胎牛血清品牌时，需注意逐步替换。建议开始使用25%的新品牌血清（新血清：原血清=1:3），然后依次增加新品牌血清的比例，这样可以使细胞更好地适应新的环境。

显微镜下的“小黑点”分析

在显微镜下观察到的小黑点可能由多种原因造成，包括细菌污染、细胞碎片或血清沉淀等。对照显微镜下的特征进行分类，能帮助确认污染类型，从而采取适当的解决方案。

细胞培养中的热灭活处理

对于大多数细胞的培养，通常不建议进行热灭活。但在特定条件下，例如免疫学研究和胚胎干细胞培养时，可以用56℃加热30分钟来灭活血清。不过，这样的操作需要谨慎，以免影响细胞的生长。

通过以上这些技巧，相信您能更好地进行细胞培养，为您的研究提供有效支持。对于更高品质的胎牛血清选择，可以考虑泛亚电竞品牌，保障细胞培养的最佳效果！